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用Spectradyne的nCS1的微流控纳米粒度仪5分钟测定病毒滴度

作者:www.willnano.com 日期:2022-09-11 点击:197
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nCS1微流控纳米粒度仪测定病毒滴度的特点:

准确测定病毒颗粒数量与浓度

3-5min可得滴度测定结果

无需细胞或者组织培养

测定仅需3ul样品

 

疫苗开发、传染病研究以及细胞和基因治疗中经常会用到病毒滴度测定的数据。有两种常用的分析方法:传染性分析,如空斑或聚焦形成分析,以及测量特定病毒粒子成分的化学/物理分析,如ELISA和PCR技术。这些常见的技术是劳动密集型的,可能需要几个小时到几天的时间来完成。

在监测病毒生产的处理或浓缩步骤实时情况,能够快速测量病毒滴度数据,对过程监控十分重要。Spectradyne的nCS1微流控纳米粒度仪完美地满足了这一需求,通过提供3-5分钟的直接滴度测量。图1显示了人腺病毒的nCS1病毒滴度测量的可重复性,而图2用图形说明了纯化过程中的快速测量如何有助于量化纯化步骤的有效性。


图 1 人类腺病毒5的nCS1微流控纳米粒度仪重复测量值

图 1 人类腺病毒5的nCS1微流控纳米粒度仪重复测量值

所测量的浓度如表格插图所示。重复数据的差异系数为6.5%。三种滴度测量每次只需要5分钟就可以完成。


图2 用nCS1微流控纳米粒度仪快速滴度测量不同纯化过程中的病毒滴度

图2 用nCS1微流控纳米粒度仪快速滴度测量不同纯化过程中的病毒滴度

产品中病毒的浓度和纯度随着纯化的各个阶段而增加。

 

图 3 Spectradyne nCS1微流控单颗粒粒度分析仪和微流控芯片样品池

图 3 Spectradyne nCS1微流控单颗粒粒度分析仪和微流控芯片样品池

使用一次性微流控墨盒(右)进行分析只需要3 μL的分析物,这可以防止测量之间的污染,并消除了清洗要求。

 

图 4 nCS1微流控粒度仪的微流控电阻脉冲感应技术(MRPS)工作原理

图 4 nCS1微流控粒度仪的微流控电阻脉冲感应技术(MRPS)工作原理

流体中的颗粒通过纳米级狭缝(NC),如图4左侧所示。一个电压被连续地施加在NC的两侧上。当粒子通过NC时,输出信号随粒子的体积成比例地变化。粒子是单独测量的,不依赖于粒子材料,不需产生散射信号、无惧吸光、每个颗粒都被测量同时可以记录不同粒径下的颗粒数量(浓度测定结果)。


 Spectradyne nCS1微流控单颗粒粒度分析仪测定病毒滴度,不需考虑病毒形状:

图5显示了马拉巴病毒的nCS1测量值。Maraba是一种圆柱形病毒:该样品的透射电镜图像显示一个直径=为65nm,长度为180nm的圆柱体。通过计算圆柱的体积,并将其转换为等效球面直径(ESD),我们能够正确预测nCS1测量的平均直径为100nm。MRPS直接测量粒子的体积,不像光学技术必须假定球形粒子。


图 5 Maraba病毒粒径与滴度测定

图 5 Maraba病毒粒径与滴度测定



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