水飞蓟油是从菊科植物水飞蓟(SilybummarianumGaertn,S.M.G)中提取得到的,其中含有水飞蓟素(silymarin,SM)､水飞蓟宾､水飞蓟宁､水飞蓟亭等有效成分｡临床研究表明,水飞蓟油对慢性肝炎､各种肝损伤､肝纤维化和早期肝硬化等肝病等均有明显疗效｡但由于水飞蓟油难溶于水,口服生物利用度低,极大的限制了其临床疗效｡为了解决这个问题,本研究结合脂质体的靶向性和缓释性,探索把水飞蓟油制备成水飞蓟油脂质体｡

仪器与材料

RE-52A型旋转蒸发仪;

PSS激光粒度仪(苏州微流纳米生物技术有限公司代理);

JEM-1200EX型透射电子显微镜;

UV757CRT型紫外可见分光光度计;

KQ400KDB型高功率数控声波清洗器｡

水飞蓟油;卵磷脂､胆固醇(国药集团);亚油酸标准品,氯仿,甲醇,0.45μm微孔滤膜｡

实验方法

1.采用薄膜分散法制备脂质体,将处方量卵磷脂､胆固醇､水飞蓟油溶解于5ml氯仿,在旋转蒸发仪上减压蒸干有机溶剂,达胶态后,加入适量体积的磷酸盐缓冲溶液(PBS),于35℃水浴恒温振荡至完全水化,用0.45μm微孔滤膜过滤3次,即得｡

2.取按优化制备工艺制备的水飞蓟油脂质体适量,滴入至载玻片上,用2.0%磷钨酸负染,再滴至喷碳铜网表面,自然晾干,使粒子尽量铺满整个铜网,于透射电子显微镜下观察并照相,可见水飞蓟油脂质体为球状小囊泡,外观圆整。

3.取按优化制备工艺制备的水飞蓟油脂质体,用激光粒度仪测定脂质体的平均粒径及粒径分布,水飞蓟油脂质体的粒径为(149.2±59.5)nm｡

结果

脂质体的制备方法主要有注入法､声波分散法､逆相蒸发法､冷冻干燥法､薄膜分散法等｡而本实验中所用的薄膜分散法方法简便,操作简单,条件温和,适用于油类药物的脂质体的制备｡水飞蓟油为脂溶性药物,可溶于氯仿,不溶于水和乙醚,根据这一性质,本文采用薄膜分散法并运用正交试验设计制备水飞蓟油脂质体脂质体｡

 图. 载药脂质体粒径测定结果

讨论

需要注意的是,形成薄膜的过程中,应尽量除尽氯仿,才能提高脂质体的包封率｡本实验中用薄膜分散法制备得到的脂质体,包封率高,粒径较小,粒径分布范围窄｡脂质体膜材-药物的比例也是影响包封率的主要因素之一,若膜材用量多,药物量少,虽然脂质体对药物的包封率高,但脂质体的含药量少,造成脂质体膜材的浪费｡